Ratusz od początku swego istnienia aż do 1931 roku, kiedy został przekazany na cele muzealne, był budowlą, w której urzędowały władze miasta. Murowany budynek wybudowano na przełomie XV/XVI w. w stylu gotyckim. Pierwsza przebudowa ratusza miała miejsce w latach 70. XVI wieku. Budynek zyskał wówczas renesansowy wygląd.
Muzeum Historii Tarnowa i Regionu funkcjonuje w dwóch renesansowych kamienicach zlokalizowanych przy północnej pierzei tarnowskiego rynku. Historia starszej z nich, Rynek 20, sięga roku 1565, młodszej, oznaczonej jako Rynek 21 prawdopodobnie roku 1568.
Siedziba Muzeum Ziemi Tarnowskiej mieści się w kamienicy przy tarnowskim Rynku. W budynku znajdują się: Dział Sztuki, Dział Administracji, Dział Finansowy oraz dyrekcja. Na parterze oraz w piwnicy znajdują się sale ekspozycyjne, w których prezentowane są wystawy czasowe.
Ze względu na duże zainteresowanie ekspozycją „Zofia Stryjeńska. Między wiarą a obrzędem” Muzeum Ziemi Tarnowskiej zdecydowało o wydłużeniu godzin jej zwiedzania w niedziele w marcu i kwietniu.